Įvadas
Bakterinė vaginozė (BV) yra makšties gleivinės disbiozė, kuriai būdingos specifinio kvapo ir spalvos išskyros, lydimos niežulio, peršėjimo, skausmingo šlapinimosi ar diskomforto lytinių santykių metu. Tai dažna patologija, kai kuriose šalyse BV paplitimas siekia net 50 proc. (4). Su BV siejama daugybė patologijų, tokių kaip antrojo trimestro persileidimas, priešlaikinis gimdymas, infekcija po aborto, padidėjusi ŽIV, gonorėjos, chlamidijų ir trichomonų infekcijų rizika, vėžinių gimdos kaklelio pakitimų vystymasis. BV išlieka aktuali visuomenės problema, o nesant tinkamo gydymo, blogėja ligonių gyvenimo kokybė. Vadinasi, būtina anksti įtarti ligą ir skirti tinkamas gydymo ir profilaktikos priemones.
BV patogenezėje svarbi mikroorganizmų bioplėvelė
BV išsivysto dėl makšties mikroflorą sudarančių bakterijų, tokių kaip dominuojančios laktobacilos, genitalinės mikoplazmos, Gardnerella vaginalis, anaerobinės bakterijos (pvz., peptostreptokokai) ir kitų kiekybinio santykio pasikeitimų. Vis dėlto svarbiausia struktūra BV patogenezėje laikoma makšties gleivinės paviršiuje iš mikroorganizmų susiformavusi bioplėvelė, kurioje didžiausią dalį sudaro G. vaginalis bakterijos. Bioplėvelė sudaro palankias sąlygas daugintis anaerobiniams ir fakultatyviniams anaerobiniams organizmams bei pasiekti tokią koncentraciją, kuri sukelia klinikinius simptomus (1011 bakt./ml ir daugiau). Bakterijos bioplėvelės viduje yra inertiškos būsenos, tai apsunkina antimikrobinių medžiagų (antibiotikų) priėjimą prie bakterijų bei gydymo efektyvumą. Bioplėvelė apsaugo bakterijas nuo visiško sunaikinimo, todėl didėja infekcijos pasikartojimo dažnis. Būtent dėl šios priežasties BV gydymas sukelia daug problemų (2, 3).
Kova su G. vaginalis mikroorganizmu
G vaginalis identifikuojama kaip labiausiai paplitusi kolonizuojanti (patogeninė) bakterija moterų, sergančių BV, makštyje. Vaginolizinas (VLY) yra baltymas toksinas, gaminamas G. vaginalis bakterijų. VLY turi citolitinį aktyvumą ir yra laikomas pagrindiniu G. vaginalis virulentiškumo veiksniu. Radus efektyvių priemonių, kurios slopintų VLY sukeltą ląstelių irimą, BV prevenciją bei gydymą galima būtų padaryti gerokai efektyvesnį (1).
Šiuo klausimu keletą metų intensyviai dirbo grupė mokslininkų iš Vilniaus biotechnologijos instituto. Padarius prielaidą, kad BV prevencijai ir terapijai galima būtų panaudoti antikūnus ar jų fragmentus prieš VLY, sukonstruotas viengrandis imunoglobulino variabiliosios dalies fragmentas (scFv). Šis antikūno fragmentas genų inžinerijos būdu gautas iš 2 hibridomos (prieš VLY nukreiptų, antikūnus produkuojančių ląstelių) linijų ir perkeltas į E. coli ląsteles, iš kurių gautas aktyvus scFv baltymas. Iš kiekvienos hibridomos sukonstruota po 2 variantus antivaginolizino (anti-VLY scFv), susidedančio iš VL-VH arba VH-VL antikūno grandinių, kurios sujungtos 20 aminorūgščių ilgio seka (G4S4). Naujai sukonstruotas scFv baltymas yra išskiriamas iš E. coli ląstelėse susidariusių intarpinių kūnelių, naudojant metalo chelatinę chromatografiją ir kitus baltymų gryninimo metodus. Pagamintas VLY surišantis scFv baltymas (anti-VLY), neutralizuojantis VLY. Neutralizavimo potencija (neutralizuojantis scFv baltymo aktyvumas) buvo tiriama in vitro hemoliziniu metodu, naudojant žmogaus eritrocitus, arba citolitiniu metodu, naudojant HeLa ląstelių liniją. Nustatyta tikroji Kd vertė (scFv antikūno ir antigeno sąveikos ir afiniškumo konstanta) ir neutralizavimo stiprumas buvo artimi pilno ilgio antikūnams. VH-VL ir VL-VH scFv variantai parodė panašų afiniškumą ir neutralizavimo potenciją. Anti-VLY, gautas iš hibridomos klono 9B4, parodė didžiausią VLY neutralizuojantį aktyvumą apsaugant žmogaus eritrocitus ir gimdos kaklelio epitelio HeLa ląsteles nuo terpėje esančio VLY (1).
Tolesni tyrimai parodė, kad rekombinantinis anti-VLY scFv slopina VLY sukeltą ląstelių irimą. Išgrynintas scFv baltymas parodė artimą, bet šiek tiek mažesnį afiniškumą ir neutralizuojantį veikimą, palyginti su atitinkamais pilno ilgio antikūnais. Tačiau tai galima kompensuoti naudojant didesnę scFv baltymo koncentraciją (1 pav.). Sukurti scFv baltymai yra pirmieji rekombinantinių viengrandžių antikūnų su VLY neutralizavimo aktyvumu pavyzdžiai, pagaminti prokariotinių ląstelių (E. coli) ekspresijos sistemose. G. vaginalis sukeliamos infekcijos ir toliau yra didelė problema pasaulyje, todėl neutralizuojančių rekombinantinių antikūnų sukūrimas gali tapti perspektyviu terapiniu agentu, kuris naudojamas BV, sukeltos G. vaginalis, prevencijai ir gydymui (1).
Nauja viltis dėl BV gydymo ir profilaktikos
BV gydymą sudaro 2 etapai – skiriamas antibakterinis gydymas ir atkuriama makšties ekosistema, siekiant išvengti ligos pasikartojimo. BV gydoma vaistais, slopinančiais anaerobinių kultūrų augimą. Paprastai skiriamas antibakterinis gydymas geriamuoju metronidazoliu, tinidazoliu, klindamicinu. Neretai vietiškai vartojami metronidazolio geliai ir klindamicino kremai. Tiesa, šių vaistų vartojimą apsunkina galimi nepageidaujami reiškiniai, kurie ypač nelaukiami nėštumo metu. Dėl G. vaginalis suformuotų bioplėvelių antibiotikai sunkiai prieina prie joje esančių anaerobų, kurie, nutraukus gydymą, vėl pradeda daugintis, tad liga recidyvuoja. Dažna komplikacija – grybelinė infekcija. Antibiotikai nėra selektyvūs, jie naikina ir laktobacilas, taip sudarydami sąlygas grybelinei infekcijai plisti.
BV gydyti sukurta ir medicininė priemonė makšties ovulė, kurios sudėtyje yra antikūno fragmentas prieš G. vaginalis toksiną (vaginoliziną) – antivaginolizinas (scFv). Tokios anti-VLY ovulės neutralizuoja G. vaginalis toksiną, priemonės veikimo režimas yra mechaninis. Vadinasi, anti-VLY neprasiskverbia į organizmą, bet stabdo patogeninių bioplėvelių susidarymą ir BV intensyvumą bei plitimą. Tokio tipo medicininės priemonės skirtos BV profilaktikai ir gydymo efektyvumui didinti. Siūloma nauja BV terapija yra pagrįsta G. vaginalis toksino neutralizavimu, naudojant specifinio antikūno fragmentą, kuris slopina G. vaginalis prisikabinimą prie epitelio ir bakterinių bioplėvelių formavimą (2 pav.). Minėtos ovulės vaistinėse pasirodys 2016 metų pradžioje.
Vaistinėse pasirodė unikalus intymios higienos prausiklis suanti-VLY (scFv) Lotamile®. Jis skirtas BV profilaktikai. Lotamile® prausiklis apsaugo jautrią odą nuo sudirgimo ir diskomforto, nepageidaujamų patogenų augimo, taip palaikydamas sveiką makšties mikroflorą. Prausiklis yra hipoalerginis, dermatologiškai ir toksikologiškai patikrintas naujausiais moksliniais tyrimais.
Šaltinis: „Internistas”